贫血作为一种常见的临床症状，发病原因各异，包括失血性贫血、营养性贫血及再生障碍性贫血等。贫血虽以红细胞(血红蛋白)为诊断指标，但由于发病机制不同血液中其他组分的变化亦有所不同。据报道，超过75%的癌症患者遭受贫血困扰，有些是由于疾病本身造成，还有一些是在癌症治疗过程中由放化疗而引起。放化疗引发的贫血，在红细胞降低的同时，白细胞也明显的降低，从而导致患者免疫力下降[1-3]。贫血及其引发的疲劳等症状严重影响患者的生存质量，也限制了化疗药物的临床应用。重组人红细胞生成素等抗贫血药已经成功应用于临床以改善患者的生存质量[4-6]。血速升颗粒具有促进骨髓造血功能、提升全血细胞数量、增强机体免疫力的功效，可应用于多种原因引发的贫血症状，组方分析其主要成分为黄芪、当归、阿胶、鸡血藤、淫羊藿、山楂。根据药理作用：黄芪、当归、阿胶具有促进骨髓造血功能，增进造血干细胞分化，提升血细胞数量的作用[7-13]；鸡血藤具有提升白细胞数量，减轻因放化疗造成的白细胞减少症的作用[14-15]；淫羊藿可提升免疫细胞的数量和活性，增强机体免疫功能[16-17]。但血速升颗粒经过配伍组方后，其药物时效、疗程，以及提升红细胞、白细胞水平情况等仍未明确。本实验针对缺血性贫血模型及化疗性贫血进行非临床药效学研究，多指标评价血速升颗粒对血液成分的影响，这对于指导临床用药具有重要意义。

1 材 料 与 方 法

1.1 实验动物 Wistar大鼠(SPF级)，雄性，54只，体重200～220 g；KM小鼠(SPF级)，雌雄各半，60只，体重22～25 g。所有动物均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，生产许可证号为SCXK(京)2012-1-0001，饲养于河北医科大学基础医学院药理学教研室IVC动物房，实验动物使用许可证号为SYXK(冀)2013-0023。

1.2 仪器与药物 Sysmex XT-2000i全自动血液分析仪(SYSMEX公司，日本)；卡铂注射液(批号：WB2J1603008，齐鲁制药有限公司)；阿胶补血口服液(批号：160316，山东福胶集团有限公司)；升血调元颗粒(批号：151106，广东环球制药有限公司)；康艾注射液(批号：01150407，长白山制药股份有限公司)；地榆升白片(批号：151205，成都地奥集团天府药业股份有限公司)；血速升颗粒(批号：078150901，石药集团河北永丰药业有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 小鼠急性失血性模型 昆明小鼠60只，随机分为5组，每组12只，雌雄各半，分别设定为空白对照组A、空白对照组B、模型对照组、血速升颗粒组(试验组)、阿胶补血口服液组(阳性对照组)。以各药物临床推荐最大剂量按体表面积折算给药剂量，血速升颗粒以0.5%羧甲基纤维素钠混悬，给药剂量为6 g/kg体重；阿胶补血口服液给药剂量为10 mL/kg体重；空白对照组及模型对照组均按0.1 mL/10 g体重灌胃给予生理盐水。各组每天给药1次，连续给药15 d，给药后第7天开始造模。模型对照组及各给药组小鼠，自造模之日起由眼底静脉丛放血0.15 mL/10 g，隔日放血1次，共3次，造模完成。取首次放血，检测模型对照组、血速升颗粒组和阿胶补血口服液组血液指标；取第3次放血，检测空白对照组A、模型对照组、血速升颗粒组和阿胶补血口服液组血液指标，处死检测空白对照组A动物；造模完成后后第4天(造模开始第8天，给药第15天)眼底静脉丛取血0.20 mL，检测空白对照组B、模型对照组、血速升颗粒组、阿胶补血口服液组血液指标，处死动物[16]。

1.3.2 大鼠化疗性贫血模型 Wistar大鼠54只，雄性，随机分为6组，每组9只，分别设定为空白对照组、模型对照组、血速升颗粒组(试验组)、升血调元颗粒组、康艾注射液组、地榆升白片组。以各药物临床推荐最大剂量按体表面积折算给药剂量，固体药物以0.5%羧甲基纤维素钠混悬，1 mL/100 g体重灌胃给药。血速升颗粒给药剂量为3 g/kg体重；血调元颗粒药剂量为3 g/kg体重；地榆升白片给药剂量为0.1 g/kg体重；康艾注射液组按0.5 mL/100 g腹腔注射给药，给药剂量为5 mL/kg体重；空白对照组及模型对照组均按1 mL/100 g体重灌胃给予羧甲基纤维素钠。各组每天给药1次，连续给药33 d，康艾注射液给药后第4天，其他药物给药后第7天开始造模。模型对照组及各给药组大鼠，单次尾静脉注射卡铂注射液0.4 mL/100 g体重，折合给药剂量为40 mg/kg体重，造模完成。于造模当天(0 d)，造模后第4天、第8天、第14天、第21天及第26天分别眼底静脉丛采血0.2 mL，进行血液指标检测[16]。

1.4 观察指标 应用Sysmex XT-2000i，选择手工模式，分类检测；血液样本为动物全血，EDTAK2(40∶1，v/v)抗凝，取血后2 h内检测完毕。选择白细胞(white blood cell，WBC)、红细胞(red blood cell，RBC)、血红蛋白(hemoglobin，Hb)、血小板(platelet，PLT)及网织红细胞(resolution enhancement technology，RET)共5项作为评价指标。同时，每天记录动物的精神状态及体重变化。

1.5 统计学方法 应用SPSS 22.0统计学软件分析数据，计量资料比较采用重复测量的方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 小鼠急性失血性模型

2.1.1 各组小鼠WBC变化 各组WBC水平均为先升高后降低，其组间与组间·时点间交互作用差异均无统计学意义(P>0.05)，而时点间差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 血速升颗粒对小鼠失血性贫血WBC的影响
Table 1 Effects of XueSuSheng granule on WBC of hemorrhagic anemia in mice

2.1.2 各组小鼠RBC、Hb变化 各组RBC、Hb水平先降低后升高，其组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2，3。

表3 血速升颗粒对小鼠失血性贫血Hb的影响
Table 3 Effects of XueSuSheng granule on Hb of hemorrhagic anemia in mice

2.1.3 各组小鼠PLT变化 各组PLT水平均为先升高后降低，组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 血速升颗粒对小鼠失血性贫血PLT的影响
Table 4 Effects of XueSuSheng granule on PLT of hemorrhagic anemia in mice

2.1.4 各组小鼠RET变化 各组RET水平逐渐升高，组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)，见表5。

表5 血速升颗粒对小鼠失血性贫血RET的影响
Table 5 Effects of XueSuSheng granule on RET of hemorrhagic anemia in mice

2.2 大鼠化疗性贫血模型

2.2.1 一般观察结果 造模后，随着造模药物对动物机体损害的加深，模型对照组动物均表现出活动能力下降、疲惫、情绪低落，摄食减少等症状，体重均未见显著增长。

2.2.2 各组大鼠WBC变化 各组大鼠WBC计数先降低后升高，在第8天降到最低，后逐渐回升，其组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)，见表6。

表6 血速升颗粒对大鼠化疗性贫血WBC的影响
Table 6 Effects of XueSuSheng granule on WBC of chemotherapy in rats

2.2.3 各组大鼠RBC、Hb变化 化疗性贫血模型的RBC与Hb的变化具有较高的一致性，各组大鼠WBC、Hb先降低后升高，在第14天降到最低，后逐渐回升，其组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)，见表7，8。

表7 血速升颗粒对大鼠化疗性贫血RBC的影响
Table 7 Effects of XueSuSheng granule on RBC of chemotherapy in rats

表8 血速升颗粒对大鼠化疗性贫血Hb含量的影响
Table 8 Effects of XueSuSheng granule on Hb of chemotherapy in rats

2.2.4 各组大鼠PLT变化 各组大鼠PLT计数先降低后升高，在第8天降到最低，后逐渐回升，其组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)，见表9。

表9 血速升颗粒对大鼠化疗性贫血PLT的影响
Table 9 Effects of XueSuSheng granule on PLT of chemotherapy in rats

2.2.5 各组大鼠RET变化 RET计数除空白对照组外，均先降低后升高，康艾注射液第4天最低，其余各组第8天最低，后逐渐回升，其组间、不同时间点、组间·时间点交互作用差异均有统计学意义(P<0.05)，见表10。

表10 血速升颗粒对大鼠化疗性贫血RET的影响
Table 10 Effects of XueSuSheng granule on RET of chemotherapy in rats

3 讨 论

3.1 小鼠急性失血性模型 在本研究急性失血性模型中，造模各组，WBC减少并不显著，血速升颗粒及阳性对照药阿胶补血口服液可能对该模型WBC的升高具有一定的作用，但是由于不同个体WBC的差异较大，其差异无统计学意义。推测与急性缺血模型是创伤性放血实验，可触发动物体内的凝血过程及影响免疫过程有关，故其对WBC的影响尚不明确。对于RBC及Hb的影响则表现出了良好的一致性，各造模组在造模开始第4天已显著降低，血速升颗粒组及阿胶补血口服液组均表现出了治疗作用，且血速升组无论是第4天还是第8天指标均优于阿胶补血组。对于PLT计数造模各组并未见显著下降，反之在造模的第4天可见显著的升高，推测原因与WBC相同，与造模方式有关，对该指标的影响也尚不明确。急性缺血性贫血模型，由于并未损坏动物的骨髓造血功能，故在动物失血后，造血系统即被激活，造模各组第4天及第8天时的RET计数均显著提升，并随着恢复期逐渐升高。

结果表明血速升颗粒可显著改善急性缺血性贫血模型的RBC、Hb及RET，但对于WBC及PLT的影响，受制于模型特点，尚不明确。

3.2 大鼠化疗性贫血模型 本研究大鼠WBC计数给予卡铂造模后第4天即显著降低，造模第8天后达到最低，然后开始回升。与模型对照组比较血速升颗粒可以显著升高化疗药物伤害期(4 d)及恢复期(14 d和21 d)的WBC计数，且作用弱于康艾注射液组，优于升血调元颗粒组及地榆升白片组。

化疗性贫血模型的RBC与Hb的变化具有较高的一致性，与WBC计数相比，指标的降低滞后于WBC，造模第4天WBC及Hb未见显著降低，造模第8天显著降低，第14天达到最低。血速升颗粒可以显著升高模型恢复期(8、14、21 d)的WBC及Hb水平；升血调元颗粒仅在造模第21天显示出作用，且效果弱于血速升颗粒组；康艾注射液组指标数据最低提前出现在造模后第8天，且药物对整个恢复期均显示了显著的疗效，在造模后第21天WBC及Hb基本恢复到了造模前的水平；地榆升白片未观测到对WBC及Hb的影响。

造模药物对PLT数量具有显著影响，造模后第4天即显著降低，造模后第8天最低可降到正常值的20%～30%。血速升颗粒未见明显升高PLT作用，相反在造模后第4天与模型对照组相比，PLT，差异有统计学意义，结合在小鼠急性失血性贫血模型中的表现，血速升颗粒对PLT的影响有待于进一步深入研究。康艾注射液可显著升高PLT、升血调元颗粒组在恢复末期表现出一定的作用，地榆升白片对PLT没有影响。

造模第4天RET即受到严重抑制，并一直持续到第8天，在第14天时RET开始回升。结果表明血速升颗粒及康艾注射液可以显著减弱造模药物对RET的抑制和促进恢复期RET的回升，升血调元颗粒也具有一定促RET生成作用，但弱于血速升颗粒组及康艾注射液组。在模型恢复末期(21 d)由于血速升颗粒和康艾注射组的血细胞和Hb水平已接近正常值，故相应的RET开始回调，有所降低。未见地榆升白片对RET的显著影响。

文献报道抗肿瘤药物卡铂造模的给药浓度为单次60 mg/kg体重，预实验发现该剂量造模一周后会引起大量动物死亡，本研究造模剂量调整为40 mg/kg体重[18]。降低剂量后，模型对照组与空白对照组比较各检测指标仍可见极显著降低，表明模型程度仍然较深，从而可能导致了测试药物起效较晚。造模第26天(给药33 d)，模型对照组指标均已基本恢复正常，给药已经没有意义，故本研究未提供具体数据。

总之，血速升颗粒通过刺激骨髓的造血功能，对于化疗药物引起的WBC和RBC减少、Hb水平降低均有一定的疗效，在化疗药物伤害期及恢复期均可显著提升WBC、RBC数量及Hb含量，且能刺激RET的生成，对PLT的影响亦不明显。对全血除PLT外各检测指标作用均弱于对照药康艾注射液，但强于全指标升血对照药物升血调元颗粒和升白药物地榆升白片。血速升颗粒临床上不仅可用于肿瘤化疗患者WBC水平低下的治疗，亦可用于改善不同原因引起的RBC减少，改善贫血症状。

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