正常情况下机体内各淋巴器官及淋巴细胞相互协调，维持机体正常的免疫功能。近年来研究证实肿瘤患者肿瘤发生过程中普遍存在免疫功能异常，主要表现为免疫功能低下和(或)免疫平衡失调。肿瘤部位一般存在长期的慢性炎症反应，慢性炎症影响T淋巴细胞及机体对癌细胞的识别和清除，造成癌细胞的免疫逃避。血液T淋巴细胞亚群的检测是评价机体细胞免疫水平的重要方法，血常规是临床三大常规检测之一，白细胞相关参数可以初步反映机体炎症状态，本研究测定晚期胃癌患者T淋巴细胞亚群和血常规相关参数，旨在探讨这些参数在胃癌患者中的表达变化。

1 资 料 与 方 法

1.1 一般资料 选择2011年1月—2015年3月在我院住院治疗的晚期胃癌患者126例(病例组)，男性84例，女性42例，年龄40～74岁，平均(61.61±8.60)岁，临床分期为Ⅲ或Ⅳ期，均有明确病理学诊断。对照组98例，为同期正常体检人群，男性60例，女性38例，年龄40～77岁，平均(59.63±8.71)岁。2组年龄、性别构成差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 检测方法 留取所有入选者空腹静脉血4 mL，分别进行T淋巴细胞亚群测定或血常规测定。应用FACSCantoTMⅡ流式细胞仪或3700全自动血细胞分析仪，用FACSCDiva软件进行上样及结果分析，试剂为Beckman-Coulter公司出产，血细胞分析仪试剂及质控品均为美国雅培公司配套试剂。血常规检测参数包括白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数，血红蛋白、血小板计数等，并计算中性粒细胞/淋巴细胞比值。

1.3 统计学方法 应用SPSS 11.0统计软件分析数据。计量资料比较分别采用独立样本的t检验和配对t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组T淋巴细胞亚群表达 与对照组相比，病例组外周血CD3+和CD4+明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)；2组CD8+和CD4+/CD8+比值差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 2组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+表达比较
Table 1 Expression of CD3+,CD4+，CD8+,CD4+/CD8+between two groups

2.2 2组血常规相关参数比较

2.2.1 病例组治疗前血常规相关参数与对照组比较 病例组治疗前外周血中白细胞计数、中性粒细胞计数和中性粒细胞/淋巴细胞比值均高于对照组， 淋巴细胞计数低于正常对照组(P<0.05)，血小板计数与对照组比较无明显变化(P>0.05)。提示病例组细胞免疫存在一定程度的紊乱，并普遍存在贫血现象。见表2。

表2 2组治疗前血常规参数比较
Table 2 The routine parameters analysis of 2 groups before treatment

2.2.2 病例组治疗后血常规相关参数与对照组比较 病例组治疗后外周血中白细胞计数接近正常(P>0.05)，但是细胞构成比例有较大差异，表现为中性粒细胞计数偏高而淋巴细胞计数偏低，中性粒细胞/淋巴细胞比值仍高(P<0.05)，血红蛋白和血小板计数降低(P<0.05)。见表3。

表3 2组治疗后血常规参数比较
Table 3 The routine parameters analysis of the 2 groups after treatment

2.2.3 病例组治疗前后血常规相关参数比较 患者出院后第一个月末有66例患者进行了血常规测量，与治疗前相比，治疗后外周血中白细胞计数、中性粒细胞计数和血小板计数均降低(P<0.05)，淋巴细胞计数和血红蛋白变化不大(P>0.05)。提示患者感染状态得到一定程度的纠正。见表4。

表4 病例组治疗前后血常规相关参数比较
Table 4 The routine parameters analysis of the case group before and after treatment

3 讨 论

T淋巴细胞既是人体细胞免疫的主要效应细胞，也是免疫系统的重要免疫调节细胞，在维持机体正常免疫功能、杀伤肿瘤细胞、控制肿瘤生长中起重要作用。外周T淋巴细胞亚群数量和功能发生异常，可导致免疫系统紊乱并引发一系列的病理变化，这些变化可能与肿瘤的发生和发展有关。

贾云泷等[1]报道与早期患者相比，晚期食管癌患者引流淋巴结中，T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞和自然杀伤细胞比例明显降低，B细胞和T-reg细胞比例显著提高，CD4+/CD8+T细胞比值差异则无统计意义，认为肿瘤部位存在淋巴细胞亚群分别紊乱，这种紊乱与肿瘤的淋巴结转移有关。李则学等[2]则发现胃癌患者外周血CD4+记忆T细胞、CD8+记忆T细胞及Treg细胞比例显著升高，并且均与淋巴结转移相关，认为胃癌患者在荷瘤状态下体内呈现为免疫抑制状态。本研究结果显示，与对照组相比，病例组外周血CD3+T淋巴细胞和CD4+T淋巴细胞明显降低(P<0.05)，而CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+比值差异无统计学意义(P>0.05)。本研究对象均为晚期胃癌患者，这些患者外周血T淋巴细胞亚群变化与贾云泷等[1]结果较为相似，但是本研究中CD8+T淋巴细胞未发现明显变化。

T淋巴细胞不同亚群在肿瘤发生过程中可能发生不同的变化。Okita等[3]发现，发生转移的患者与非转移患者相比，转移性肿瘤患者淋巴结效应T细胞明显低于无转移，记忆效应T细胞在转移组显著低于对照组和非转移组，淋巴结中记忆效应T细胞与CD4+/CD8+比值之间存在显著正相关；另外，在转移患者淋巴结中Th1向Th2转化比例较低，而Treg明显高于非转移患者，CD4+T细胞和效应T细胞亚群与肿瘤发生转移显著相关，转移患者表现为免疫抑制细胞向淋巴结迁移，这与肿瘤微环境中的免疫耐受有关。Kindlund等[4]发现在胃癌组织中，CD4+FOXP3+Treg细胞增殖的幅度高于CD4+FOXP3-Treg细胞，认为这可能有助于组织黏膜内Treg的积累，通过DNA甲基化分析，进一步发现增殖或非增殖型FOXP3+Treg细胞均可以促进FOXP3基因的甲基化，提示这2种类型的Treg细胞均可稳定表达FOXP3；此外，分析直接从肿瘤和肿瘤游离黏膜分离的T细胞群表明，CD4+CD25highT细胞比CD4+CD25lowT细胞有较高的IL-10和IFN-γ基因表达，但TGF-β表达水平低，在胃癌组织中，CD4+FOXP3+CD25highT细胞表现出很强的增殖调控，这些局部Treg细胞表达抑制性细胞因子，增高IL-10浓度并降低TGF-β和IFN-γ浓度。Choi等[5]则发现胃癌组织淋巴细胞亚群中，CD8+T细胞在CD3+T细胞的高频率与总生存率增加相关，CD4+T细胞亚群中的Treg细胞的高表达与总生存率增加相关，CD4+T细胞亚群中的高水平Treg细胞有利于机体生存。

陈培等[6]对乳腺癌、肺癌、胃癌和结直肠癌4种癌症进行研究，发现患者总T淋巴细胞比例有降低趋势，但差异无统计意义(P>0.05)；乳腺癌和肺癌患者CD8+T淋巴细胞占总淋巴细胞的比率高于胃癌和结直肠癌患者，而CD4+T淋巴细胞占总淋巴细胞的比率低于胃癌和结直肠癌患者(P<0.05)，认为不同肿瘤发生过程中，T淋巴细胞亚群可能存在不同的变化反应。乳腺癌患者腋窝淋巴结CD4+细胞比率和CD4+/CD8+比值低于乳腺良性病变患者，CD8+细胞高于乳腺良性病变组，而且与临床分期有关[7]。Earle等[8]发现，在胃癌Ⅱ/Ⅲ期患者中，临床治疗方案选择和治疗效果与肿瘤免疫细胞浸润类型相关，他们对多种白细胞亚群进行分析研究，发现白细胞CD45和CD45R0是较好的预后标志物。利用microRNA可以将胃癌分为不同的亚型，而microRNA分类的某些亚型与临床生存期直接相关[9]。利用T淋巴细胞表面标志，基于人细胞毒性T淋巴细胞膜的仿生递送平台研究，为药物治疗的靶向研究[10]，可从分子生物水平对胃癌检测、诊断及治疗提供理论基础。

血常规检测是临床三大常规检测之一，一般医院均可开展，在感染或应急状态下，患者血常规检测会出现不同项目的异常，其中白细胞和血小板是与炎症相关的指标。检测患者外周血中白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数及比例可初步反映机体的免疫或应激状态。肿瘤患者肿瘤部位普遍存在长期的慢性炎症反应，患者外周血可表现为中性粒细胞/淋巴细胞比值升高。Leibowitz-Amit等[11]在玛格丽特癌症中心对前列腺癌患者进行调查研究，测定前列腺特异性抗原、血常规等多项指标，分析影响前列腺癌患者治疗效果和总生存率的因素，Logistic回归分析表明中性粒细胞/淋巴细胞比值是影响前列腺癌患者前列腺特异性抗原浓度及总生存率的独立危险因素，提出中性粒细胞/淋巴细胞比值是肿瘤促进炎症的间接表现。

本研究发现，晚期胃癌患者外周血白细胞计数、中性粒细胞计数和中性粒细胞/淋巴细胞比值高于对照组，淋巴细胞计数低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。对于中性粒细胞/淋巴细胞比值是否可以作为临床预后指标以及临界值的设定，医学工作者进行了多方面的研究。Forget等[12]对720例乳腺癌患者进行回顾性调查分析，探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值与乳腺癌患者无病生存率及总生存率的关系，多因素回归计算风险比和95%CI，发现在这些患者中，中性粒细胞/淋巴细胞比值>3.3的患者无病生存率和总生存率均明显缩短(无病生存率：风险比为1.99，95% CI为1.16～3.41；总生存率：风险比为2.35，95% CI为1.02～5.43)；而在胰腺癌晚期患者中，中性粒细胞/淋巴细胞比值>5的患者与中性粒细胞/淋巴细胞比值<5的患者相比，总生存率也明显缩短(8.8个月 vs 12.8个月)，对远处转移、复发性、糖类抗原19-9、癌胚抗原和C反应蛋白的水平进行校正后，中性粒细胞/淋巴细胞比值仍然是胰腺癌患者总生存率的独立危险因素(风险比为1.95；95%CI为1.29～2.95)。在治疗过程中，中性粒细胞/淋巴细胞比值降低到5以下的患者比未降低到5以下的患者总生存率长[13]。

Absenger等[14]回顾分析了504例Ⅱ或Ⅲ期结肠癌患者，以4为分界点将患者分为2组，评价中性粒细胞/淋巴细胞比值与患者术后复发及总生存率的关系，研究发现中性粒细胞/淋巴细胞比值升高与术后复发显著相关，术前中性粒细胞/淋巴细胞比值≤4的患者术后复发时间均值为92.6个月，而中性粒细胞/淋巴细胞比值>4的患者则为62.2个月(P<0.01)[14]。而Shibutani等[15]对674例Ⅰ～Ⅳ结直肠癌患者分析发现，这些患者中性粒细胞/淋巴细胞比值平均为2.74±2.20，利用工作曲线确定中性粒细胞/淋巴细胞比值临界值为2.5，中性粒细胞/淋巴细胞比值数值的差异是否与实验仪器及人群异质性有关，以及如何设定中性粒细胞/淋巴细胞比值临界值仍需要更多的研究。

我国目前对于中性粒细胞/淋巴细胞比值与胃癌的研究也有部分报道。李坚等[16]对213例胃癌患者进行分析，按中性粒细胞/淋巴细胞比值是否大于4分为高中性粒细胞/淋巴细胞比值组及低中性粒细胞/淋巴细胞比值组，分析中性粒细胞/淋巴细胞比值与病理TNM分期、患者性别、年龄、肿瘤侵润、淋巴结转移、远处转移及血小板计数等因素，发现这些因素均与中性粒细胞/淋巴细胞比值升高相关(P<0.05)，低中性粒细胞/淋巴细胞比值组1、3、5年累计生存率分别为92.6%、84.7%、64.1%，而高中性粒细胞/淋巴细胞比值组1、3、5年累计生存率则分别为80.1%、50.8%、44.4%。李晨等[17]也认为对于胃癌患者术前测定分析中性粒细胞/淋巴细胞比值，对于评估患者是否发生淋巴结转移有重要作用，他们分析了244例胃癌患者术前中性粒细胞/淋巴细胞比值与术后病理分析结果的关系，发现以中性粒细胞/淋巴细胞比值为4为临界点，将患者分为高中性粒细胞/淋巴细胞比值组及低中性粒细胞/淋巴细胞比值组，结果发现高中性粒细胞/淋巴细胞比值组与低中性粒细胞/淋巴细胞比值组相比，患者淋巴结转移率、肿瘤直径、Borrmann分型等均增加，提出术前中性粒细胞/淋巴细胞比值测定可作为术前淋巴结分期的补充并对术中淋巴结清扫范围和清扫数量有指导意义。中性粒细胞/淋巴细胞比值还与心脏功能相关，左心室收缩功能不全中性粒细胞/淋巴细胞比值水平明显偏高，在校正了年龄、冠状动脉介入/冠状动脉搭桥治疗等因素后，中性粒细胞/淋巴细胞比值仍是急性冠状动脉综合征患者左心室收缩功能不全的独立危险因素[18]。本研究纳入患者均为胃癌Ⅲ或Ⅳ期，中性粒细胞/淋巴细胞比值为4.31±2.84，而正常人群中性粒细胞/淋巴细胞比值为1.64±0.52，中性粒细胞/淋巴细胞比值临界点的划分在不同癌症类型、不同临床分期尚需要更多的研究。对中性粒细胞/淋巴细胞比值进行更多的研究，对于临床将中性粒细胞/淋巴细胞比值作为一个肿瘤患者治疗及预后判断的简单有用的生物标记物具有重要意义。

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