miR-145、ABCD2评分联合动脉超声对TIA患者进展为脑梗死的风险评估价值分析

大多数学者认为，短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack，TIA)发病病因可能和血管微小栓塞、血流动力学改变有着一定的关联[1]。TIA是神经内科的常见病、多发病，是一种由颈动脉或者椎基底动脉系统发生血供不足导致的脑组织局灶性缺血所造成的突发、短暂的可逆性神经功能障碍。该病可作为脑梗死的一种预警信号[2-3]。脑梗死又称缺血性脑卒中，是一种脑部血液循环障碍，由缺血或缺氧所导致的局限性脑组织缺血坏死或者软化[4-5]。大量临床研究显示，血管平滑肌细胞出现异常增生会导致动脉粥样硬化的出现，而动脉粥样化的出现常会导致脑缺血的出现。微小RNA-145(microrna-145,miR-145)是一种血管平滑肌细胞表型和增殖的一种重要的调节因子，对miR-145进行过表达能够促进血管平滑肌细胞的分化、抑制平滑肌细胞的增殖[6]。TIA发生后有着极高的概率进展为脑梗死，所以对TIA患者进行早期的诊断以及同时结合影像学检查评估及其预估尤为重要[7]。ABCD2评分(age blood pressure,clinicalfeatures,durationofsymptoms,diabetes)量表是一种临床上用来预测TIA短期进展为脑梗死的一种较为有效的方法，其中A代表着年龄、B代表血压、C代表着临床特征、D代表着症状持续时间以及糖尿病[8]。两种方法均对TIA的转归有一定预测价值，但目前对于miR-145联合ABCD2评分表的研究较少。为临床对TIA患者进行更有效风险评估，本研究中使用miR-145、ABCD2评分联合动脉超声对TIA发作后进展为脑梗死患者进行检测，旨在探究miR-145、ABCD2评分联合动脉超声对TIA发作后进展为脑梗死的风险评估价值分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2019年2月—2020年2月我院神经内科收治的TIA患者132例，按照有无近进展为脑梗死分为TIA未进展为脑梗死组和TIA进展为脑梗死组，TIA未进展为脑梗死组患者76例，TIA进展为脑梗死组患者56例。其中TIA未进展为脑梗死组包括男性41例，女性35例，年龄60～72岁，平均(66.0±4.8)岁；TIA进展为脑梗死患者组包括男性32例，女性24例，年龄65～76岁，平均(70.5±4.4)岁。所有患者一般资料比较差异无统计学意义(P<0.05)，具有可比性。

纳入标准：所有患者在入院时均经过头磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)+扩散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)检测确诊为TIA患者。排除标准：①合并有心、肝、肾等器官功能不全者；②依从性差者；③所有患者均无异常肿瘤等疾病。

所有患者及家属对本研究均知情，并通过我院伦理委员会认可，伦理委员会批准文号(2020)伦申第(56号)。

1.2.1 检测方法 miR-145检测：提取miR-145总RNA，检测RNA纯度、含量，逆转录处理后获得cDNA，使用Primer5.0软件设计引物，采用2-△△Ct方法计算，内参U6。设置反转录反应条件：25 ℃ 10 min,40 ℃ 60 min,85 ℃ 5 min；设置扩增条件:94 ℃ 20 s、72 ℃ 30 s、60 ℃ 30 s,35个循环，采用2-△△Ct方法计算出需要检测的miR-145表达量。

ABCD2评分检测[9]：根据Johnson以及Roth等提出的ABCD2评分法进行评分，最高分数为7分，0～3分为低危人群，4～5分为中危人群，6～7分为高危人群。

miR-145+ABCD2+动脉超声检测：受检者取头后仰卧位，在颈后置一低枕，使用M2540A型多普勒超声显像仪进行检测，将探头调至7.5 MHz进行检测。检查颈部一侧血管时，头颈部偏向的对侧约45 ℃，充分暴露颈部。将颈部直接置于颈部，从长轴和纵轴两个方向连续扫查血管走行情况以及解剖结构。观察颈总动脉、颈总脉分叉处、椎动脉颅外段以及双侧锁骨下动脉，对TIA进展情况进行检测评比。使用动脉超声检测后联合miR-145、ABCD2评分对TIA进展为脑梗死患者进行评判。

1.2.2 纤维蛋白原(fibrinogen，FIB)、超敏C-反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平检测比较使用酶联免疫吸附法检测FIB、hs-CRP、LDL-C水平，将血清置于室温后，标记酶标板，制作标准品，然后取出试剂盒，以1∶2的稀释液稀释样品；在反应孔上依次加入稀释好的待测血清和标准品100 μL/孔，放置37 ℃恒温孵育箱中湿育2 h；然后用专用的洗涤液将反应板清洗3次，再加入抗体工作液(1∶100倍稀释后)100 μL/孔，放于37 ℃恒温孵育箱中湿育45 min；继续清洗反应板4次后，在反应孔内加入TMB溶液100 μL/孔，置于37℃恒温孵育箱中湿育45 min后在反应孔内加入终止液100 μL/孔终止反应，在450 nm波长测定吸光度，颜色反应深浅与FIB、hs-CRP、LDL-C水平成正比，经绘制标准曲线计算FIB、hs-CRP、LDL-C水平。

1.2.3 检查结果统计对所有受检者分别进行miR-145、ABCD2评分、miR-145+ABCD2+动脉超声检测检查后的确诊情况以及漏诊、误诊情况进行统计，比较三种检测手段的漏诊率和误诊率。

1.2.4 诊断效能对血清检测和多普勒超声诊断的敏感度、特异度和准确性进行统计。敏感度=真阳性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%。特异度=真阴性例数/(真阴性例数+假阳性例数)×100%。准确度=(真阳性例数+真阴性例数)/总例数×100%。

1.3 统计学方法应用SPSS20.0统计软件分析数据。计量资料比较采用两独立样本的t检验；计数资料比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者ABCD2评分和miR-145表达比较与TIA未进展为脑梗死组相比，TIA进展为脑梗死组患者ABCD2评分上升，miR-145表达下降，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 2组患者FIB、hs-CRP、LDL-C水平比较与TIA未进展为脑梗死组相比，TIA进展为脑梗死组患者FIB、LDL-C水平下降，hs-CRP水平上升，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3 各种检测手段对TIA进展脑梗死的检测率比较 miR-145检测和ABCD2评分检测相比，两种检测手段对TIA进展脑梗死的检出率相比差异有统计学意义(P>0.05)；与miR-145检测和ABCD2评分检测，miR-145+ABCD2评分+动脉超声检测对TIA进展脑梗死的检出率有所上升(P<0.05)。见表3。

2.4 3种检测手段漏诊、误诊情况比较 miR-145检测手段和ABCD2评分检测手段漏诊率、误诊率相比，差异无统计学意义(P>0.05)；与miR-145检测手段和ABCD2评分检测手段相比，miR-145+ABCD2评分+动脉超声检测手段误诊率、漏诊率较低，但差异无统计学意义(P<0.05)。见表4。

2.5 3种检测手段敏感度、特异度和准确度比较 miR-145检测和ABCD2评分检测的敏感度、特异度和准确度比较，差异无统计学意义(P>0.05)；与miR-145检测和ABCD2评分检测手段比较，miR-145+ABCD2评分+动脉超声检测敏感度、特异度和准确度有所上升(P<0.05)。见表5。

3 讨论

TIA是一种脑、脊髓或者视网膜等局部局灶性缺血所导致的一种短暂性的神经功能缺损，属于较为常见的缺血性脑血管疾病。该病的发生与动脉粥样硬化、动脉狭窄以及血流动力学异常等多种因素密切相关[10-11]。TIA的转归有着几种情况，进展为脑梗死便是其中之一。TIA作目前依然成为短期内发生脑梗死的特级警报，单一的因素预测难以预测TIA进展为脑梗死的准确性较低[12]。TIA进展为脑梗死是多种危险因素共同的作用，其中颅内外大血管动脉粥样化病变是其重要的危险因素，是由颈动脉易损斑块导致颅内血管血流动力学改变，从而促进TIA进展为脑梗死的重要风险因素[13-14]。脑梗死是一种高致残率的疾病，脑梗死急性期和后续的治疗将会产生巨大的费用支出，往往会导致患者丧失劳动能力，甚至生活无法自理或者死亡，对社会和家庭造成严重的负担。为了有效的避免TIA进展为脑梗死，对其进行早期积极的临床干预尤为重要[15-16]。

大量临床研究显示，miR-145、miR-127等miRNA是影响粥动脉硬化稳定性的重要因素。miRNA是一类微小非编码RNA，单个的miRNA能够对多个的mRNA发挥抑制作用。大量临床研究显示，miR-145可能同时调节不同的mRNA，其在动脉粥样硬化中发挥着重要的作用，表现在对血管平滑肌细胞的炎症水平、转分化的调控。ABCD2评分是目前最成熟和应用最为广泛的模型，具有一定的应用价值。TIA后早期内发生脑梗死往往是由多种危险因素共同的结构，其危险因素越多，发生脑梗死的风险越高。ABCD2评分是由年龄、血压、临床特征、症状持续时间和糖尿病5项内容组成，总分为7分，分数越高证明患者病症越严重[17-18]。李杰等[19]在研究中指出，ABCD2评分越高，患者TIA进展为脑梗死的概率就越高。本研究中使用miR-145、ABCD2评分联合动脉超声对TIA患者进行检测，结果显示，TIA发作后进展为脑梗死患者的ABCD2评分较高。说明使用miR-145、ABCD2评分联合动脉超声对TIA发作后进展为脑梗死患者进行检测，能够提高对患者的准确率和诊断效能。

FIB是由肝细胞合成和分泌的一种糖蛋白，是一种参与凝血和止血过程中的重要蛋白纤维蛋白。高FIB是各种血栓性疾病重要的危险因素，在临床上被认定疾病状态的标志物。hs-CRP是机体受到微生物入侵或者组织损伤等炎症性刺激时肝细胞合成的急性相关蛋白。血浆中LDL-C是运输内源性胆固醇的主要载体，能够通过结合其细胞膜上的低密度脂蛋白受体被降解和转化。大量临床研究显示，FIB、LDL-C、hs-CRP与TIA发作后进展为脑梗死患者具有一定的相关性，对FIB、LDL-C、hs-CRP进行检测，能够对TIA发作后进展为脑梗死病症的发生发展直观的评价[20]。吴跃华等[21]在研究中指出，TIA进展为脑梗死患者FIB水平异常下降，说明FIB与TIA发作后进展为脑梗死病症有着密切的关联。本研究显示，对其进行检测显示，TIA发作后发展脑梗死患者FIB水平异常下降，说明血清FBI与TIA发作后发展脑梗死患者有着密切的关联。

综上所述，使用miR-145、ABCD2评分联合动脉超声对TIA患者进行检测，可对于TIA进展为脑梗死患者的检出率上升，漏诊、误诊情况有所降低，降低了TIA发作后进展为脑梗死的风险评估，对TIA发作后进展为脑梗死有着重要的临床。

[1] Coutts SB.Diagnosis and management of transient ischemic attack[J].Continuum(Minneap Minn)，2017，23(1):82-92.

[2] Nakagawa T,Hasegawa Y,Uekawa K,et al.Transient mild cerebral ischemia significantly deteriorated cognitive impairment in a mouse model of Alzheimer′s disease via angiotensin AT1 receptor[J].Am J Hypertens,2017,30(2):141-150.

[3] Zhu L,Wang L,Ju F,et al.Transient global cerebral ischemia induces rapid and sustained reorganization of synaptic structures[J].J Cereb Blood Flow Metab,2017,37(8):2756-2767.

[4] Perera AH,Rudarakanchana N,Monzon L,et al.Cerebral embolization,silent cerebral infarction and neurocognitive decline after thoracic endovascular aortic repair[J].Br J Surg,2018,105(4):366-378.

[5] Wang Q,Yu H,Jiang C,et al.Cerebral infarction as initial presentation in stress cardiomyopathy:Case report and literature review[J].Medicine(Baltimore),2018,97(20):e10804.

[6] Shan W,Chen W,Zhao X,et al.Long noncoding RNA TUG1 contributes to cerebral ischaemia/reperfusion injury by sponging mir-145 to up-regulate AQP4 expression[J].J Cell Mol Med,2020,24(1):250-259.

[7] Yao LZ,Chen F,Dai ZY,et al.The application of intravoxel incoherent motion diffusion imaging and 3D arterial spin labeling perfusion imaging in the evaluation of acute cerebral infarction[J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi,2019,99(47):3725-3731.

[8] Xi HY,Si ZH,Li JC,et al.Assessment of cerebral infarction after transient cerebral ischemic attack by ABCD2 score combined with the position of intracranial vascular stenosis[J].Medicine(Baltimore),2019,98(15):e15081.

[9] 李尚坤,余恒旺,崔美莲,等.ABCD2评分法结合头颈部CTA对短暂性脑缺血发作后脑梗死的预测价值[J].中西医结合心脑血管病杂志,2019,17(10):1573-1575.

[10] 徐原科,周正,李贺恒,等.后循环短暂性脑缺血发作患者血浆D-二聚体、纤维蛋白原、血小板的变化[J].临床检验杂志,2020,38(5):356-358.

[11] 李璇,吴江,杨朝慧,等.MRA、3D-ASL及IVIM技术在短暂性脑缺血发作中的应用价值研究[J].磁共振成像,2020,11(5):321-325.

[12] 陈玉娟,刘斌,李梦雨,等.短暂性脑缺血发作进展为脑梗死的危险因素研究进展[J].海南医学,2020,31(9):1183-1186.

[13] 吴跃华,路雅宁,肖雅娟,等.7d内短暂性脑缺血发作进展至脑梗死相关因素分析[J].国际老年医学杂志,2019,40(3):140-142.

[14] 郗红艳,司志华,李家承,等.ABCD2评分联合颅内近端责任血管狭窄率对短暂性脑缺血发作患者短期进展为脑梗死的风险评估价值研究[J].实用心脑肺血管病杂志,2018,26(12):35-38.

[15] 陈向华,武英伟,马海峰,等.Lp-PLA2对短暂性脑缺血发作后发生脑梗死风险的预测价值[J].国际检验医学杂志,2017,38(4):465-467.

[16] 阮清源,尹虹祥,魏衡.Hs-CRP水平与ABCD2评分对短暂性脑缺血发作患者近期预后的评估价值[J].神经损伤与功能重建,2018,13(7):331-334.

[17] 刘美霞,刘群会,朱祖欣,等.急性脑梗死患者血清lncRNA SNHG14和miR-145-5p水平变化及其与疾病发生风险的关系[J].卒中与神经疾病,2020,27(1):47-51,55.

[18] 王丽,戴海琳,唐旭,等.ABCD2评分联合MRA检查对短暂性脑缺血发作后发生脑梗死的预测价值[J].成都医学院学报,2020,15(5):595-598.

[19] 李杰,李颖,吴立梅,等.MR三维动脉自旋标记灌注成像联合ABCD2评分在TIA发作早期发生脑梗死预测的价值[J].中国医学装备,2020,17(3):62-66.

[20] 李江坤,张津华,付志新,等.表现为短暂性脑缺血发作患者ABCD2评分与hs-CRP的相关性分析[J].中国实用神经疾病杂志,2017,20(6):78-80.

[21] 吴跃华,林黎明,刘燕平,等.纤维蛋白原、颈动脉粥样硬化斑块与短暂性脑缺血发作后脑梗死相关性[J].齐齐哈尔医学院学报,2018,39(13):1527-1529.

miR-145、ABCD2评分联合动脉超声对TIA患者进展为脑梗死的风险评估价值分析

1 资料与方法

2 结 果

3 讨 论

Analysis of the risk assessment value of miR-145, ABCD2 score combined with arterial ultrasound for the progression of cerebral infarction after TIA attack

2 结果

3 讨论