河北医科大学学报

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类风湿性关节炎患者血浆和关节滑液中miR-16的表达

  

  1. 1.河北医科大学第三医院检验科,河北 石家庄 050051;2.济宁医学院附属医院检验科,山东 济宁 272029
  • 出版日期:2016-03-25 发布日期:2016-05-11
  • 作者简介:冯忠军( 1968- ),男,河北泊头人,河北医科大学第 三医院主任技师,医学硕士,从事临床检验学研究。

Expression of miR16 in plasma and synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis

  1. 1.Department of Laboratory Medicine, the Third Hospital of Hebei Medical University,
    Shijiazhuang 050051, China;2.Department of Laboratory Medicine, the Affiliated
    Hospital of Jining Medical College, Jining 272029, China
  • Online:2016-03-25 Published:2016-05-11

摘要: [摘要] 目的 通过检测 miR-16 在类风湿关节炎( rheumatoidarthritis , RA )患者血浆和关节滑液中的表达,
探讨其在 RA 鉴别诊断以及病情评估中的应用价值。方法 应用茎环逆转录引物的 SYBRGreenⅠ 实时荧光定量
PCR 法检测 RA 患者血浆、关节滑液以及单核细胞( peripheralbloodmononuclearcell , PBMC )中 miR-16 的表达水
平,以 U6snRNA 为内参,另有 10 例骨关节炎( osteoarthritis , OA )作病例对照。结果 目的基因 miR-16 和内参
U6snRNA 的扩增曲线及熔解曲线均良好,未出现非特异性产物及引物二聚体现象。 miR-16 在血浆中表达水平显
著高于关节滑液和外周血 PBMC ( P <0.01 ); miR-16 在 RA 患者 PBMC 中的表达水平显著高于正常对照组( P <
0.01 )。与 OA 患者相比, miR-16 在 RA 患者关节滑液中的表达水平显著升高( P <0.01 )。血浆中 miR-16 表达与
疾病活动 度 量 表 ( Disease ActivityScore , DAS28 )评 分 呈 负 相 关 (
P <0.05 ),与 红 细 胞 沉 降 率 ( erythrocyte
sedimentationrate , ESR )及 C 反应蛋白( C-reactiveprotein , CRP )均无相关性( P >0.05 ); PBMC 中 miR-16 表达与
DAS28 评分、 ESR 及 CRP 均呈正相关( P <0.05 );关节滑液中 miR-16 表达与 DAS28 评分、 ESR 及 CRP 均无相关
性( P >0.05 )。结论 茎环逆转录引物的 SYBRGreenⅠ 实时荧光定量
PCR 法是灵敏而且特异的 miRNA 检测方
法。血浆和关节滑液 miR-16 的来源并不相同,在血浆和关节滑液中可能存在不同的 miRNA 表达谱。 miR-16 的
表达水平可望用于 RA 与 OA 的鉴别诊断以及作为 RA 病情活动度的有效评价指标。

关键词: 关节炎, 类风湿, 滑液, 微RNAs

Abstract: [
Abstract ] Objective ToobservetheexpressionlevelsofmiR-16inplasmaandsynovial
fluidfrompatientswithrheumatoidarthritis ( RA ), andtoexploreitsvalueinearlydifferented
diagnosisandin predictionofdiseaseseverityof RA.Methods Plasma , peripheralblood
mononuclearcell ( PBMCs ) andsynovialfluidweretakenfrompatientswithRAandosteoarthritis
( OA ) .The expression level of miR-16 was detected by stem-loop real-time fluorescent
quantitativepolymerasechainreaction ( stem-loopFQ-PCR ) withSYBRGreenⅠdye , andusing
U6snRNAasendogenouscontrol.Results Bothoftheamplicationcurvesandthedissociation
curvesofmiR-16andU6snRNA wererunningwell.Noprimerdimmerswereformed , andthe
productsofPCRwerespecific.TheexpressionlevelofmiR-16inplasmawashigherthanthosein
synovialfluidandPBMCs , respectively ( P <0.01 ) .TheexpressionlevelofmiR-16inPBMCs
washigherforRApatientsthanforhealthycontrols ( P <0.01 ), thelevelinsynovialfluidwas
higherforRApatientsthanforOApatients ( P <0.01 ) .TheexpressionlevelofmiR-16inplasma wasinverselycorrelated withtheDisease ActivityScore ( DAS28 )( P <0.05 ), butwasnot
correlatedwitherythrocytesedimentationrate ( ESR ) andC-reactiveprotein ( CRP ) .themiR-16
levelinPBMCswaspositivelycorrelatedwithDAS28 , ESRandCRP ( P <0.05 ) .ThemiR-16
levelinsynovialfluidhadnocorrelationswithDAS28 , ESRandCRP ( P >0.05 ) .Conclusion
Stem-loopFQ-PCR with SYBR Green Ⅰdye wasasensitiveandspecific methodforthe
quantitativedetectionofmiRNAs.Thereweredistinctprofilesinplasmaandsynovialfluid , and
theexpressionlevelofmiR-16insynovialfluidcanbeamarkerfordifferentialdiagnosisofRA
andOA.Theexpressionlevelofplasma miR-16canserveasaneffectivenovelindicatoron
assessmentoftheclinicaldiseaseactivity.