摘要: [摘要] 目的 通过检测 miR-16 在类风湿关节炎( rheumatoidarthritis , RA )患者血浆和关节滑液中的表达,
探讨其在 RA 鉴别诊断以及病情评估中的应用价值。方法 应用茎环逆转录引物的 SYBRGreenⅠ 实时荧光定量
PCR 法检测 RA 患者血浆、关节滑液以及单核细胞( peripheralbloodmononuclearcell , PBMC )中 miR-16 的表达水
平,以 U6snRNA 为内参,另有 10 例骨关节炎( osteoarthritis , OA )作病例对照。结果 目的基因 miR-16 和内参
U6snRNA 的扩增曲线及熔解曲线均良好,未出现非特异性产物及引物二聚体现象。 miR-16 在血浆中表达水平显
著高于关节滑液和外周血 PBMC ( P <0.01 ); miR-16 在 RA 患者 PBMC 中的表达水平显著高于正常对照组( P <
0.01 )。与 OA 患者相比, miR-16 在 RA 患者关节滑液中的表达水平显著升高( P <0.01 )。血浆中 miR-16 表达与
疾病活动 度 量 表 ( Disease ActivityScore , DAS28 )评 分 呈 负 相 关 (
P <0.05 ),与 红 细 胞 沉 降 率 ( erythrocyte
sedimentationrate , ESR )及 C 反应蛋白( C-reactiveprotein , CRP )均无相关性( P >0.05 ); PBMC 中 miR-16 表达与
DAS28 评分、 ESR 及 CRP 均呈正相关( P <0.05 );关节滑液中 miR-16 表达与 DAS28 评分、 ESR 及 CRP 均无相关
性( P >0.05 )。结论 茎环逆转录引物的 SYBRGreenⅠ 实时荧光定量
PCR 法是灵敏而且特异的 miRNA 检测方
法。血浆和关节滑液 miR-16 的来源并不相同,在血浆和关节滑液中可能存在不同的 miRNA 表达谱。 miR-16 的
表达水平可望用于 RA 与 OA 的鉴别诊断以及作为 RA 病情活动度的有效评价指标。