摘要： [摘要] 目的 建立多种呼吸道病原体的多重实时荧光定量聚合酶链反应( multiplexreal-time-PCR , MRT-
PCR )检测方法。方法 根据生物信息学分析结果选定各种呼吸道病原体的靶序列,建立 MRT-PCR 检测体系。构
建质粒标准品,检测建立体系的敏感度、特异度和重复性,并运用 MRT-PCR 和单荧光定量 PCR 检测临床样本进
行对比分析。结果 成功建立了多种呼吸道病原体的 MRT-PCR 检测体系;该方法特异度较好,最低检测限为 10
copies / μ L ,重复性良好,变异系数为 0. 99%~2. 50% , 530 例临床样本中, MRT-PCR 检测的阳性率为 59. 2% ( 314 /
530 ),单荧光定量 PCR 检测的阳性率为 61. 1% ( 324 / 530 ),阳性检出率差异不大。结论 建立快速、敏感、特异、稳定
的 MRT-PCR 检测体系,具有良好的临床应用前景。
