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›› 2007, Vol. 28 ›› Issue (4): 245-245.

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前炎症细胞因子MDC和IL-18基因的快速克隆

吴淑慧;王晓凌;崔海平;高志云;谢立新;金玉怀   

  1. 河北医科大学基础课教学部病原与预防教研室,河北,石家庄,050091%河北医科大学基础医学院病原生物学教研室,河北,石家庄,050017%河北省荣誉军人康复医院妇产科,河北,邢台,054000
  • 发布日期:2007-07-25

FAN Ping;LIU Yang;WANG Wei;WANG Lei;CUI Hui-xian;SHI Ge-ming

WU Shu-hui;WANG Xiao-ling;CUI Hai-ping;GAO Zhi-yun;XIE Li-xin;JIN Yu-huai   

  • Published:2007-07-25

摘要: 目的 改进巨噬细胞源趋化因子(macrophage-derived chemokine,MDC)基因和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)基因的克隆方法.方法 BALB/c小鼠随机分为烫伤组和非烫伤组.烫伤组小鼠脾细胞经脂多糖刺激培养48 h提取总RNA,其肺组织直接提取总RNA; 非烫伤组脾细胞用前列腺素E2刺激培养72 h后提取总RNA,肺细胞用脂多糖刺激培养12 h后提取总RNA.两组小鼠脾细胞的总RNA分别经反转录-聚合酶链反应(reverse trascription-polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增MDC基因片段,肺组织的总RNA分别用RT-PCR扩增IL-18基因片段.将扩增片段分别与pGEM-T载体连接,通过酶切和测序鉴定.结果 烫伤组成功扩增出预期大小的DNA片段,序列测序证实为MDC cDNA和IL-18 cDNA.非烫伤组均未扩增成功.结论 烫伤组比非烫伤组易获得前炎症细胞因子,其有可能成为快速有效获取前炎症细胞因子的手段.

关键词: 趋化因子, 巨噬细胞, 白细胞介素18, 克隆, 分子, 小鼠

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