摘要： 目的 观察化学缺氧剂二氯化钴(CoCl2)诱导缺氧条件下,Eca109食管癌细胞中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的变化,并观察缺氧对放射敏感性的影响.方法 CoCl2用于建立Eca109食管癌细胞体外缺氧培养模型,并设对照组(CoCl2 浓度为0 μmol/L).观察缺氧培养不同时相(0、8、16、24h) Eca109细胞HIF-1α和VEGF的表达及对放射敏感性的影响.反转录聚合酶链反应方法检测HIF-1α和VEGF mRNA的转录水平,免疫印迹实验(Western Blot)检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况.集落形成实验观察细胞的放射敏感性.结果 逆转录聚合酶链反应检测HIF-1α和VEGF mRNA结果显示, CoCl2缺氧处理后(0、8、16、24 h),HIF-1α和VEGF mRNA表达增加;但随着缺氧时间的延长(8、16、24 h),HIF-1α mRNA的表达没有明显改变(P>0.05);VEGF mRNA转录在缺氧培养8、16、24 h后显著升高,且不同时间组间存在显著性差异(P<0.05).Western Blot检测结果显示,缺氧处理后HIF-1α和VEGF蛋白表达显著提高(P<0.05).克隆形成实验结果显示,照射4Gy后,缺氧加放射组、单纯放射组细胞存活分数分别为48.3%和21.7%(P<0.05).结论 食管癌细胞系Eca109在缺氧条件下,HIF-1α和VEGF蛋白表达上调,放射敏感性降低.
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