摘要： 目的 研究淋巴增强因子1(lymphoid enhancer-binding factor 1,LEF1)基因在脱甲基化药物5-氮-2-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytine,DAC)联合紫杉醇(paclitaxel,PTX)治疗(renal cell carcinoma,RCC)中发挥协同作用的机制.方法 应用定量PCR测定二者联合应用时LEF1 mRNA表达量变化.2种肾癌细胞株ACHN、NC65分别用DAC:0.5、1、2、4、8μmol/L;PTX:1、2、4、8、16nmol/L;DAC(1、2μmol/L)+PTX(1、2、4、8、16nmol/L)处理3d.Rneasy mini kit(Qiagen)抽提tRNA,First strand cDNA synthesis kit (Amasham Pharmacia)逆转录合成cDNA第1条链,Real-time PCR采用SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems)进行扩增,IQ5进行荧光定量分析.结果 通过Real-time PCR测定出DAC与PTX 2种药物联合应用时LEF1下降,且显著低于PTX或DAC单剂作用效果.结论 应用Real-time PCR进行了验证,LEF1是DAC和PTX治疗肾癌相乘作用中的重要靶基因.
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