摘要： [摘要] 目的 以骨髓增生异常综合征( myelodysplasticsyndromes , MDS )细胞系 SKM-1 细胞为研究对象,在
体外观察青蒿琥酯(
artesunate , ART )对 SKM-1 细胞脱氧核糖核酸甲基转移酶( DNA methyltransferase , DNMT1 )
基因表达的影响,以期为临床应用 ART 治疗中高危 MDS 患者提供体外实验的理论依据。方法 ART 干预体外细
胞培养 MDS 细胞 SKM-1 细胞系,采用逆转录聚合酶链反应( reverstranscription-polymerasechainreaction , RT-
PCR )法观察 DNMT1 的 mRNA 改变,采用蛋白印迹法观察 DNMT1 蛋白表达改变。采用实时定量 RT-PCR 法观
察 DNMT1 靶基因 p15INK4b 表达的改变,采用甲基化 PCR 法观察 p15INK4b 启动子甲基化的改变。结果 1 、 5 、
10 μ mol / L 的 ART 处理 SKM-1 细胞后 DNMT1 基因表达低于对照组,差异有统计学意义( P <0.05 )。 1 、 5 、 10
μ mol
/ L 各剂量组间差异无统计学意义( P >0.05 )。 DNMT1 蛋白表达 1 、
10 μ mol / L 低于对照组,差异有统计学意
义( P <0.05 ); 1 、
10 μ mol / L 组 低于 5 μ mol / L 组,差 异有 统计 学意 义 ( P <0.05 ); ART 处 理 SKM-1 细 胞 后
DNMT1 基因 3 、 6 、 12h 处理组低于对照组,差异有统计学意义( P <0.05 ); 3h 、 6h 与 12h 差异有统计学意义( P <
0.05 )。 DNMT1 蛋白 3 、 6 、 12h 处理组低于对照组,差异有统计学意义( P <0.05 )。 ART 处理后 p15INK4b 的
mRNA 水平 5 、 10 μ mol / L 组、地西他宾组高于对照组,差异有统计学意义( P <0.05 )。 p15INK4b 的 mRNA 水平
在 10 μ mol / L 组是这 5 个处理组中最高的,并且 1 μ mol / L 、 5 μ mol / L 、地西他宾组与 10 μ mol / L 组比较,差异有统
计学意义( P <0.05 ); ART 处理 SKM-1 细胞后 DNMT1 蛋白靶基因 p15INK4b 启动子甲基化程度下降,各组差异
无统计学意义; ART 组非甲基化启动子较其他 2 组上升,差异有统计学意义(
P <0.05 )。结论 ART 通过抑制
DNMT1 的转录和蛋白表达来恢复 SKM-1 细胞中的 p15INK4b 的表达,进而发挥其抑癌作用。
