分泌抗丙型肝炎病毒NS5蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

摘要/Abstract

摘要： 目的建立能稳定分泌抗丙型肝炎病毒(HCV)NS5重组蛋白单克隆抗体(McAb), 并对其生物学活性进行实验室鉴定.方法用重组HCV NS5区蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠, 取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP 2/0进行融合,经有限稀释克隆3次后制备分泌McAb的杂交瘤细胞株,并用酶免疫(EIA)法对其分泌抗体进行初步鉴定.结果融合后的阳性克隆中筛选出6株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株,命名为2C8,2D2,1D6,2G2,1F5和1F10.这6株McAb与NS5重组抗原均有良好的反应性, 杂交瘤培养上清的EIA抗体滴度为1∶400～1∶1 600, 其中1株诱生的同系小鼠腹水滴度为1∶80 000.这6株McAb均为IgG1亚型.结论该McAb的制备,可为HCV感染者血清和肝组织中抗原检测方法的建立和生物工程药物的研制创造条件.

关键词: 抗体, 单克隆/分离和提纯, 肝炎病毒/分离和提纯, HCV NS5区重组蛋白/方法, 小鼠

中图分类号:

R512.6

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分泌抗丙型肝炎病毒NS5蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

Liu Zhimin;Hou Yuchun;Quan Jiangtao;Yan Hui;Zhou Jinxia

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