摘要： 目的构建柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1与白细胞介素-15(interleukin-15,IL-15)双表达基因疫苗,并观察其对小鼠的免疫效果.方法从CVB3 VP1基因的重组质粒pcDNA3/VP1上扩增出带有完整表达构件的VP1基因,克隆至IL-15基因重组质粒pcDNA3/IL-15,构建成双表达重组质粒pcDNA3/VP1-IL-15,转化DH5a大肠杆菌,大量扩增后,肌内注射Balb/c小鼠, 1次/周,共3次,每次免疫后第6天取血清,用微量中和试验方法检测血清中和抗体.第3次免疫后的第7天,用800TCID50 CVB3 感染小鼠,观察各组小鼠的生存情况.结果构建的pcDNA3/VP1-IL-15重组质粒目的基因与CVB3-VP1和IL-15的序列相同;免疫小鼠后pcDNA3/VP1-IL-15重组质粒能诱导机体产生中和抗体,抗体滴度随免疫次数增加而提高;病毒攻击后pcDNA3/VP1-IL-15和pcDNA3/VP1+pcDNA3/ IL-15组较其他组生存时间明显延长(P<0.05).结论本研究成功构建了pcDNA3/VP1-IL-15真核双表达重组质粒;该质粒能诱导机体产生中和抗体,对CVB3毒株的攻击有一定程度的保护作用.
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