卡介菌基因组DNA的制备及其免疫调控活性研究

摘要/Abstract

摘要： 目的探索一种利用离子交换层析技术制备高纯度卡介菌基因组DNA(genomic DNA from mycobacterium bovis Bacillus calmette-Guérin,BCG-DNA)的方法,并探讨其免疫调控活性.方法运用超声、加热、胰酶消化、离子交换层析、凝胶过滤层析及冻干法制备高纯度BCG-DNA;小鼠脾细胞与BCG-DNA共同培养72 h,采用ELISA方法检测细胞培养上清中干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的水平.结果所制备的BCG-DNA纯度较高(DNA 95.3%),片断大小均匀一致,集中于200～250 bp;BCG-DNA可显著诱导小鼠脾细胞产生IFN-γ(P＜0.01),且IFN-γ水平与BCG-DNA浓度呈正相关.结论利用层析法制备BCG-DNA,高效、重复性好.所制备的BCG-DNA纯度较高,具有较强的免疫调控作用.

关键词: 分枝杆菌, 牛, 基因组, 提取法, 小鼠

中图分类号:

R392.11

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