河北医科大学学报 ›› 2024, Vol. 45 ›› Issue (7): 850-854.doi: 10.3969/j.issn.1007-3205.2024.07.018
摘要: 目的 探究载脂蛋白D(apoliprotein D,APOD)激活果蝇无翅基因蛋白/β-连锁蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路参与牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs)增殖分化过程。
方法 体外培养人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs),设置空白组、APOD低剂量组、APOD高剂量组和si-APOD组。空白组于DMEM培养基培养,APOD低剂量组向培养基中加入2 nmol/L APOD,APOD高剂量组向培养基中加入32nmol/LAPOD,si-APOD组采用APOD si-RNA转染HDPCs细胞。采用RT-qPCR检测APOD mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测成骨分化能力,Western Blot检测Wnt/β-catenin通路蛋白表达量。
结果 与空白组比较,APOD低剂量组、APOD高剂量组APOD mRNA水平及细胞活力升高,7、14 d的ALP 活性升高,Wnt5a、β-catenin蛋白上调(P<0.05),si-APOD组APOD mRNA水平,细胞活力降低,7、14 d的ALP 活性降低,Wnt5a、β-catenin蛋白下调(P<0.05);与APOD低剂量组比较,APOD高剂量组APOD mRNA水平及细胞活力升高,7、14 d的ALP 活性升高,Wnt5a、β-catenin蛋白上调(P<0.05),si-APOD组APOD mRNA水平及细胞活力降低,7、14 d的ALP 活性降低,Wnt5a、β-catenin蛋白下调(P<0.05);与APOD高剂量组比较,si-APOD组APOD mRNA水平及细胞活力降低,7、14 d的ALP 活性降低,Wnt5a、β-catenin蛋白下调(P<0.05)。
结论 APOD能够促进HDPCs细胞的增殖分化,其作用机制可能与激活 Wnt/β-catenin信号通路有关。