摘要: [摘要]〓
〖HTH〗目的〖HTSS〗〖KG*2〗探讨微小RNA205、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cyserinly aspartatespecific protease,caspase3)表达水平对神经胶质瘤生物学行为的影响及其可能的作用机制。
〖HTH〗方法〖HTSS〗〖KG*2〗采用实时荧光定量PCR检测30例神经胶质瘤组织及正常脑组织中miR205表达水平;采用脂质体转染技术分别将miR205 模拟物(miR205 mimics)、对照(control mimics)、miR205抑制物(miR205inhibitor)导入至U251细胞中,以Transwell实验观察细胞侵袭能力;采用生物信息学及荧光蛋白报告基因实验验证miR205对caspase3的靶向调控作用;采用RNA干扰技术研究U251细胞中caspase3蛋白表达水平及细胞克隆数量变化。
〖HTH〗结果〖HTSS〗〖KG*2〗神经胶质瘤组织miR205表达值低于正常脑组织(P<005),30神经胶质瘤组织中28例miR205下调2倍以上。将miR205模拟物或miR205抑制剂转染入U251细胞中发现,在miR205的表达水平上,miR205模拟物显著高于对照,miR205抑制物低于对照,差异有统计学意义(P<005)。miR205模拟物转染U251细胞后caspase3蛋白表达高于对照转染后细胞(P<005)。miR205模拟物+pcDNA3Wt共转染组荧光值显著高于对照及miR205模拟物+pcDNA3Mut(P<005)。转染miR205模拟物组,其细胞克隆形成明显少于对照组及空白组,而转染miR205 inhibitor后,其细胞克隆形成则多于空白组(P<005)。
〖HTH〗结论〖HTSS〗〖KG*2〗多数神经胶质瘤存在miR205表达下调现象,而miR205可能通过靶向调控caspase3影响胶质瘤细胞的侵袭、增殖、克隆形成能力,这将为进一步认识及治疗神经胶质瘤提供有力依据。