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›› 2013, Vol. 34 ›› Issue (4): 378-378.

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利用双杂交系统筛选并鉴定与GPR30相互作用的蛋白

张蕾;常宏;徐东   

  1. 首都医科大学宣武医院心脏中心,北京,100053%河北医科大学基础课教学部生物化学教研室,河北,石家庄,050091
  • 发布日期:2013-04-25

LI Weicong;YANG Jing;WEI Yan;ZHANG Yi;ZHU Xiaoguang;ZHANG Li

ZHANG Lei;CHANG Hong;XU Dong   

  • Published:2013-04-25

摘要: 目的 筛选并鉴定与GPR30相互作用的蛋白,为GPR30蛋白亚细胞定位和功能研究提供线索.方法 应用酵母双杂交技术,构建诱饵表达载体Pgbk/GPR30,与人卵巢互补DNA(complementary DNA,cDNA)文库共转化酵母菌AH109,筛选阳性克隆并测序.利用哺乳动物双杂交系统验证GPR30与候选蛋白的相互作用.结果 从人卵巢cDNA文库中筛选出4个与GPR30结合的蛋白基因,分别是小G蛋白Rab8a、Rab40a、NM23-H2和TACC3.其中,小G蛋白Rab8a、Rab40a与GPR30的相互作用在哺乳动物双杂交系统中得到验证.结论 小G蛋白Rab8a和Rab40a可能参与了GPR30细胞内转运或与GPR30参与的信号转导有关.

关键词: 受体, 雌激素, 双杂交系统技术, 卵巢

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