ICR小鼠神经干细胞的体外培养与鉴定#br#

doi:10.3969/j.issn.10073205.2019.03.003

河北医科大学学报

ICR小鼠神经干细胞的体外培养与鉴定#br#

1.邢台医学高等专科学校公共教学部，河北邢台 054002；2.邢台医学高等专科学校基础医学部，河北邢台 054002；
3.邢台医学高等专科学校护理系，河北邢台 054002；4.邢台医学高等专科学校口腔医学系，
河北邢台 054002；5.河北医科大学基础医学院神经生物室，河北石家庄 050017

出版日期:2019-03-25 发布日期:2019-03-20
作者简介:孙孟军（1976-），男，河北邢台人，邢台医学高等专科学校讲师，医学硕士，从事基础医学研究。

In vitro culture and identification of neural stem cells in ICR mice#br#

1.Department of Public Teaching， Xingtai Medical College， Hebei Province,Xingtai 054002， China；
2.Department of Basic Medicine， Xingtai Medical College， Hebei Province,Xingtai 054002，China；
3.Department of Nursing， Xingtai Medical College， Hebei Province,Xingtai 054002， China；
4.Department of Stomatology, Xingtai Medical College， Hebei Province, Xingtai 054002，
China； 5.Department of Neurobiology， School of Basic Medical Sciences，
Heibei Medical University， Shijiazhuang 050017， China

Online:2019-03-25 Published:2019-03-20

摘要/Abstract

摘要： ［摘要］〓
〖HTH〗目的〖HTSS〗〖KG*2〗建立一种简便、易行的ICR小鼠神经干细胞（neural stem cells，NSCs）体外分离培养方法。
〖HTH〗方法〖HTSS〗〖KG*2〗分离胚胎ICR小鼠的脑组织，用无血清培养基悬浮培养；倒置显微镜观察细胞形态；免疫细胞化学染色检测特异性标记物神经上皮干细胞蛋白(巢蛋白，nestin）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）、神经元特异性烯醇化酶（neuronal specific enolase，NSE）；CCK8法绘制生长曲线。
〖HTH〗结果〖HTSS〗〖KG*2〗从ICR小鼠胚脑组织分离的细胞，在无血清培养液中以神经球形式扩增，并可经消化后连续传代。生长曲线显示细胞倍增时间为2 d。神经球内nestin阳性细胞率为（72.0±5.5）%。诱导分化后可观察到2种形态的细胞：一种具有长而粗的突起，交织成网，且GFAP阳性；另一种为胞体呈多边形、具有数个细长突起，NSE阳性。
〖HTH〗结论〖HTSS〗〖KG*2〗本方法培养的NSCs纯度高、增殖快，具有多向分化潜能，值得推广应用。

关键词: 神经干细胞, 细胞培养技术, 小鼠

Abstract: ［Abstract］〓Objective〖HTSS〗〓To establish a simple method for isolation and culture of mouse neural stem cells(NSCs) from ICR mice in vitro.
〖HTH〗〖WTHZ〗Methods〖HTSS〗〓The brain tissues of ICR mice were isolated and cultured in serumfree medium. The morphology of cultured cells was observed with an inverted microscope. The specific markers, nestin, glial fibrillary acidic protein(GFAP) and neuronal specific enolase(NSE) were detected by immunocytochemical staining to identify cells. The growth curve of the cells was plotted by CCK8 assay.
〖HTH〗〖WTHZ〗Results〖HTSS〗〓The cells isolated from the embryonic brain tissue of ICR mice were amplified in the form of neurospheres in serumfree medium, and could be passaged continuously after digestion. The growth curve showed that the cell doubling time was 2 d. The percentage of nestin positive cells was(72.0±5.5)% in neurospheres. After induced differentiation, two types of cells were observed: one has long and thick projection interlaced into a net, and is GFAP positive; the other is polygonal, with a number of slender projections, and is NSE positive.
〖HTH〗〖WTHZ〗Conclusion〖HTSS〗〓The NSCs cultured by this method has high purity, proliferate rapidly, and have the potential of multidifferentiation. Our method is worth popularizing and applying.

Key words: neural stem cells, cell culture techniques, mice

孙孟军1，郭建美2，周更苏3，董泽飞4，郑春贵3，曹翠丽5*. ICR小鼠神经干细胞的体外培养与鉴定#br#[J]. 河北医科大学学报, doi: 10.3969/j.issn.10073205.2019.03.003.

SUN Mengjun1， GUO Jianmei2， ZHOU Gengsu3， DONG Zefei4， ZHENG Chungui3， CAO Cuili5*. In vitro culture and identification of neural stem cells in ICR mice#br#[J]. Journal of Hebei Medical University, doi: 10.3969/j.issn.10073205.2019.03.003.

[1]	赵大印，刘淳，陈栋，王媛，曹雪霞，张丽娟. 人卵巢癌细胞株3AO原位移植瘤模型的建立[J]. 河北医科大学学报, 2019, 40(9): 1038-1041.
[2]	庞雅湘1，聂启昊2，刘晓宁3，王〓帅3，冯〓琦3，牛洪琳4*. 3种细胞裂解液提取总蛋白在Western blot中的效果分析[J]. 河北医科大学学报, 2019, 40(3): 263-267.
[3]	刘明峰1，杨金霞2，刘〓笑2，祁金龙2*，贾庆忠2. 血速升颗粒治疗贫血模型鼠的实验研究#br#[J]. 河北医科大学学报, 2018, 38(7): 822-827.
[4]	刘爱宁1，杨文刚1，鞠树红1，孙一鸣1，马〓骏2，周〓晖3*. 叶酸及不同剂量瑞舒伐他汀对HHcy小鼠动脉粥样硬化相关基因表达的影响[J]. 河北医科大学学报, 2018, 38(4): 378-382.
[5]	李鹏涛1，高志红1，段晓亮2，张晓丽3，张〓辉3*. 黄芪甲苷Ⅳ诱导SAMR1小鼠骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的实验研究[J]. 河北医科大学学报, 2018, 38(11): 1338-1343.
[6]	赵红伟1，张〓建1，和丽丽2，李月芹1，朱叶珊3，刘建平4*. 银杏叶提取物对肠炎小鼠免疫机制的调节作用#br#[J]. 河北医科大学学报, 2017, 37(9): 1076-1079.
[7]	龚〓淼1，张〓雷1，赵春芳1,李〓莉1，张亚楠1,任广伟2*. 普罗布考对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用与机制#br#[J]. 河北医科大学学报, 2017, 37(5): 497-500,505.
[8]	温雅,董立鹏,赵景茹,祝春华. 旋覆花内酯通过抑制炎症反应对缺血脑组织发挥保护作用[J]. 河北医科大学学报, 2016, 37(5): 497-500,505.
[9]	胡彩霞1，冯佳2，吕丽景1，高顺强1，王文氢1,张国强1*. 2-甲氧基雌二醇对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响[J]. 河北医科大学学报, 2016, 37(4): 407-411.
[10]	胡彩霞 1,江绍乾 1,张国强 1,冯佳 2,田菲 3,高顺强 1*. 2甲氧基雌二醇对恶性黑素瘤种植性肿瘤的体内抑制作用[J]. 河北医科大学学报, 2016, 37(3): 289-292.
[11]	张金文 1,杜春海 2,张杰 3. 双酚 A 暴露对 iNOS 基因缺失实验鼠生殖能力的影响[J]. 河北医科大学学报, 2016, 37(3): 328-331.
[12]	李晓坤,麻晓婷,聂磊,窦永青,韩梅 *. Sirt 1 转基因小鼠股动脉结扎后血管新生的初步研究[J]. 河北医科大学学报, 2016, 37(3): 340-342.
[13]	田小超 1,何伟亮 2,刘斯文 3,杨蓉 1,刘素云 1*. 丁苯酞注射液对小鼠的急性毒性和慢性毒性试验研究[J]. 河北医科大学学报, 2016, 37(11): 1250-1252,1256.
[14]	龚淼 1,张雷 1,赵昱 1,尹青 1,郭浅妤 1,任广伟2* . 小鼠生精细胞的体外双室无血清培养[J]. 河北医科大学学报, 2016, 37(1): 1-4.
[15]	刘洁;王洁(综述);史为博;李英敏(审校). 神经损伤后内源性 NSCs 活化增殖、分化、迁移与修复[J]. , 2015, 36(2): 226-226.

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