摘要： 目的 探讨大鼠剑突软骨细胞的培养方法,以及多聚2-羟乙基甲基丙烯酸脂(poly-2-hydroxyethylmethacrylate,poly-HEMA)在培养过程中对软骨细胞生物学特性的影响.方法 无菌条件下取Wistar大鼠的剑突,用剪刀将其剪成1 mm3大小,加入0.25%的胰酶消化30 min,然后用0.15%的胶原Ⅱ消化3～5 h.将分离得到的细胞分别接种在预先用poly-HEMA包被的平皿和普通的平皿内,并将普通平皿的细胞进行差速贴壁.通过形态学及甲苯胺蓝染色对细胞进行鉴定.结果 ①从剑突软骨可获得大量软骨细胞,每克软骨可获得软骨细胞(3.1±0.5)×107个细胞,活性率为(95.2±0.3)%.②在普通平皿内经过两次差速贴壁得到的软骨细胞较纯,甲苯胺蓝染色阳性率达90%.③软骨细胞在poly-HEMA包被的平皿内始终悬浮生长,且能长期保持软骨细胞的特性.结论 从剑突获得大量软骨细胞的方法是可行的,poly-HEMA能使体外培养的软骨细胞未经传代的情况下长期保持其生物学特性,为体外实验及组织工程研究提供优质种子细胞.
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