河北医科大学学报

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镁离子对大鼠雪旺细胞增殖及NGF分泌的影响

  

  1. 河北医科大学第二医院骨科,河北 石家庄 050000
  • 出版日期:2016-07-25 发布日期:2016-08-11
  • 作者简介:李明(1980-),男,河北隆尧人,河北医科大学第二医院主治医师,医学博士,从事骨科疾病诊治研究。
  • 基金资助:
    河北省医学科学研究重点课题(ZL20140291)

Effect of magnesium on proliferation and NGF secretion in Schwann cells of rat

  1. Department of Orthopedics, the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, China
  • Online:2016-07-25 Published:2016-08-11

摘要: [摘要] 目的 观察镁离子对体外培养大鼠雪旺细胞( Schwanncells , SCs )增殖及神经生长因子( nervegrowth
factor , NGF )分泌的影响。方法 选取出生 3~5dSD 大鼠,分离双侧坐骨神经行 SCs 体外培养,用 S-100 免疫细胞
化学染色鉴定细胞纯度。取对数生长期 SCs 分别加入含不同浓度 MgCl
2 ( 0 、 0.5 、 1 、 2 mmol
/ L )和 10%FBS 的
DMEM 培养基。分别于第 2 、 4 、 6 、 8 天, MTT 法检测 SCs 增殖情况, ELISA 法检测细胞分泌 NGF 水平。结果 经
双 30min 差速贴壁法,可以去除大部分成纤维细胞。原代培养的 SCs ,接种 24h 后即可贴壁生长。在培养的第
72h 细胞胞体出现并肩平行排列的趋势,第 7 天可见细胞聚合。经免疫组织化学检测计数,培养 6d 后的 SCs ,其纯
度达到 91% 。各组 SCs 增殖活力均呈上升趋势( A 组上升幅度最大, C 组上升幅度最小),各组分泌的 NGF 水平至
第 6 天达峰值后均下降( A 组上升幅度最大, C 组上升幅度最小), 4 组组间、不同时点间、组间·不同时点间交互作
用差异有统计学意义( P <0.05 )。结论 适宜浓度的 MgCl
2 对体外培养大鼠 SCs 的增殖和分泌功能有促进作用。

关键词: 镁, 雪旺细胞, 神经生长因子, 大鼠

Abstract: [
Abstract ] Objective Toinvestigatetheeffectofmagnesium onproliferationandnerve
growthfactor ( NGF ) secretioninSchwanncells ( SCs ) .Methods 3~5daysoldSDratswere
used.TheSCswereisolatedfromsciaticnerves invitro .Thepositivecellswerecountedbyusing
S-100immunocytochemicalstaining.SCsweredividedintofourgroups.Theculturemediumwas
DMEMcontaining10% FBSanddifferentconcentrationsofMgCl 2 ( 0 , 0.5 , 1 , 2mmol
/ L ) .MTT
wasusedtodetectthecellproliferationoftheSchwanncellsat2 , 4 , 6 , 8d.Theexpressionof
NGFwasdetectedbyELISA.Results Mostcollagenoblastwereremovedbydifferentialadhesion
about30 minutes.Theprimary-culturedSCswereadherenttotheplasticsurfaceofthecell
culturedishandgrowed24hafterinoculation.Inthe72thhourofcultivation , thecellsshowed
thetrend ofparallelarrangement.Inthe7th day , wecouldseecellaggregation undera
microscope.Throughcountingbyimmunohistochemistrytest , thepurityofSCsreached91% 6
daysaftercultivation.ThepurityofSCs was91% by S-100immunocytochemicalstaining.
Comparedwithnormaltraininggroup , 0.5mmol
/ LMgCl
2 grouphadapromotingeffectonSCs
proliferationandNGFsecretion.Thereweresignificantdifferencesin4groups , indifferenttime
points , andintheinteractionofthegroups vs timepoints (
P <0.05 ) .Conclusion Appropriate concentrationofMgCl 2 canstimulatetheproliferationandNGFsecretionofSCsofrat.

Key words: magnesium, Schwann cells, nerve growth factor, rats